怎么探索DNA甲基化的组织特异性,相信很多没有经验的人对此束手无策,为此本文总结了问题出现的原因和解决方法,通过这篇文章希望你能解决这个问题。
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表观调控领域关于DNA甲基化的研究绝对是一个热点,尤其是有那么多的技术,WGBS,RRBS,450K/850K芯片。早在2014年发表在Genome Biology 的文章:DNA methylome profiling of human tissues identifies global and tissue-specific methylation patterns 就设计实验系统性探索了 DNA甲基化的组织特异性。
该课题的实验设计是,从4个尸体解剖的人身上提取17种不同的组织部位去做450K甲基化芯片数据,在 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE50192 所以是17*4=68个芯片数据,不知道为什么上面是70个,可能是有两个样品测了两次吧。该数据是以 GSE50192_GPL13534_Matrix_signal_intensities_raw_data.txt.gz 形式公开,不过也有 https://ftp.ncbi.nlm.nih.gov/geo/series/GSE50nnn/GSE50192/matrix/GSE50192_series_matrix.txt.gz 文件,非常方便处理。
这4个尸体解剖的人死亡原因分别是;
我推测研究者肯定是拿全部的45万个甲基化位点的信号值计算相关性,所以结论是The methylation patterns were found to be well conserved between the 17 various tissues that were studied。如下:
另外很重要的结论是:
然后作者就探索这样的甲基化位点所在的基因功能区域分布情况,已经上面的基因功能。
然后采用一对多的差异分析策略,去分别独立探索每个组织与所有的其它组织的tissue-specific differentially methylated regions (tDMRs) ,得到的数量分布如下:
学徒作业:根据文末的甲基化教程目录以及教学视频,下载这个GSE50192数据集,并且把甲基化位点注释后区分开来,独立绘制甲基化信号值热图。因为位于基因组不同功能区域的甲基化探针信号值代表的生物学意义不一样,包括5’ UTR, first exon, gene body, 3’ UTR, CpG island, CpG shore, CpG shelf,这些注释,都是在厂商提供注释文件信息里面。
看完上述内容,你们掌握怎么探索DNA甲基化的组织特异性的方法了吗?如果还想学到更多技能或想了解更多相关内容,欢迎关注创新互联行业资讯频道,感谢各位的阅读!